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實驗新手來看:酶聯(lián)免疫試劑盒實驗中需用試劑的配制方法

更新時間:2014-04-17 點擊量:2102

    一項酶聯(lián)免疫試劑盒實驗的準(zhǔn)備有著這樣那樣的要求,在實驗中除了試劑盒的準(zhǔn)備還有緩沖劑、稀釋液等等需要我們自己動手來配制,可是這些配制會對許多的實驗新手朋友們會照成一個很大的困擾,所以今天上海恒遠(yuǎn)這里就來朋友們說一說實驗中需用試劑的配制方法。
1、包被緩沖液:
NaHCO3    1.59克
NaHCO3  2.93克
加蒸餾水至1000ml
2、實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·12H2O  2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%   0.5ml
加蒸餾水至1000ml
3、實驗稀釋液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.1克
加洗滌緩沖液至100ml
或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
4、實驗終止液(2M H2SO4):
蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
5、底物緩沖液:
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)   25.7ml
0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml
加蒸餾水50ml。
6、實驗TMB使用液:
TMB(10mg/5ml無水乙醇)   0.5ml
底物緩沖液(PH5.5) 10ml
0.75%H2O2               32μl
7、實驗ABTS使用液:
ABTS 0.5mg
底物緩沖液(PH5.5) 1ml
3%H2O2              2μl
8、實驗封閉液:
牛血清白蛋白(BSA)   5克
加洗滌緩沖液至100ml。
上海恒遠(yuǎn)提醒注意事項:
    實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標(biāo)板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標(biāo)孔,嚴(yán)防交叉污染。
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