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上海恒遠(yuǎn)解說酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)方法

更新時(shí)間:2015-07-29 點(diǎn)擊量:1901

   世界上zui快而又zui慢,zui長(zhǎng)而又zui短,zui平凡而又zui珍貴,zui輕易被人忽視,而又zui令人后悔的就是時(shí)間。時(shí)光匆匆飛過,還記得六月中旬的試劑盒分析會(huì)議中,我公司夏說要在2015下半年提升試劑盒的技術(shù)資料內(nèi)容,分享多多,供給廣大客戶們參考。轉(zhuǎn)眼過去,前半年度即將過去,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)部根據(jù)產(chǎn)品的原理與特性,分析解說【酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)方法】:
   首先我們要從抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定、抗原濃度的優(yōu)化、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化、酶標(biāo)抗體稀釋度的優(yōu)化、底物液的優(yōu)化、底物作用時(shí)間的優(yōu)化,然后比較結(jié)果。
1. 抗體的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定
   試劑盒收集*峰即為酶標(biāo)抗體峰。標(biāo)記完后用紫外分光光度計(jì)在分別在280nm、及403nm處測(cè)定酶標(biāo)記物的A值,計(jì)算免疫球蛋白量、摩爾比值、酶結(jié)合率以及標(biāo)記率。
2. 包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優(yōu)化
   ① 包被緩沖液的優(yōu)化:三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析,選擇*的包被緩沖液系統(tǒng)。
   ② zui適抗原包被濃度的優(yōu)化:顯色的強(qiáng)度在一定范圍內(nèi)與包被的抗原量成正比,但隨著包被抗原濃度的增加,顯色的強(qiáng)度反而降低,我們選擇臨界包被值作為包被抗原量。
3. 封閉液、洗滌液及保護(hù)液的優(yōu)化
   ① 封閉液的優(yōu)化:采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法進(jìn)行封閉,其封閉液的組成為:10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白。
   ② 洗滌液的配制:采用文獻(xiàn)報(bào)道的方法配制洗滌液。
 
4. 酶標(biāo)板保護(hù)液的優(yōu)化
    在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育放置一個(gè)晚上,同時(shí)與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對(duì)照,然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天,考察保護(hù)液對(duì)酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。
5. 酶標(biāo)抗體稀釋度、保護(hù)液的優(yōu)化
   ① 稀釋度的優(yōu)化:抗原包被濃度為4ug/ml,經(jīng)孵育、洗滌后、顯色終止后,用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析,選擇A值為1.5左右的酶標(biāo)抗體稀釋度為zui適工作濃度。
   ② 保護(hù)液的優(yōu)化:適當(dāng)?shù)木彌_液以及添加無關(guān)蛋白質(zhì)、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會(huì)對(duì)對(duì)酶標(biāo)抗體的活性起一定的保護(hù)作用,因此我們?cè)O(shè)計(jì)了一組保護(hù)劑用于保護(hù)酶標(biāo)抗體,與未添加任何糖蛋白的酶標(biāo)抗體做對(duì)照。
    以上就是【酶聯(lián)免疫試劑盒檢測(cè)方法】的分析,希望能給您們的實(shí)驗(yàn)中帶來幫助。非常感謝新老客戶長(zhǎng)期以來對(duì)我公司的信賴與支持,為適應(yīng)市場(chǎng)的需要和發(fā)展,我公司將在2016年對(duì)酶聯(lián)免疫試劑盒包裝進(jìn)行升級(jí),新包裝更加環(huán)保和精美。上海恒遠(yuǎn)歡迎您的來電,期待與您的合作!

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